The use of biomarkers as tools to evaluate genotoxicity is increasing recently. Methods that have been used previously to evaluate genomic instability are frequently expensive, complicated, and invasive. The micronuclei (MN) and nuclear abnormalities (NA) technique in buccal cells offers a great opportunity to evaluate in a clear and precise way the appearance of genetic damage whether it is present as a consequence of occupational or environmental risk. This technique is reliable, fast, relatively simple, cheap, and minimally invasive and causes no pain. So, it is well accepted by patients; it can also be used to assess the genotoxic effect derived from drug use or as a result of having a chronic disease. Furthermore the beneficial effects derived from changes in life style or taking additional supplements can also be evaluated. In the present paper, we aim to focus on the explanation of MN test and its usefulness as a biomarker; we further give details about procedures to perform and interpret the results of the test and review some factors that could have an influence on the results of the technique.

Nuclear abnormalities in erythrocytes, as micronuclei and nuclear buds (BE), are considered potential biomarkers of genotoxic exposure. We described previously the frequency of spontaneous micronucleated erythrocytes (MNE) in the species Aratinga canicularis. Here, we have used this species to evaluate the induction of MNE and BE by mitomycin-C. Animals were given a single intracoelomic injection of 0, 2, 3 or 4 mg/kg mitomycin-C on two consecutive days. A drop of blood was obtained after 0, 24, 48 and 72 h, and stained smears were used to count micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCE) and polychromatic erythrocytes with buds (BPCE)/1000 polychromatic erythrocytes. The number of MNE and BE in 10 000 total erythrocytes was also counted. MNPCE and BPCE frequencies were elevated at 24, 48, and 72 h after the administration of the lower dose (P<0.03). At a 3 mg/kg dose, the frequency of MNPCE increased at 48 and 72 h (P<0.04) whereas the number of BPCE increased, but not significantly. Administration of 4 mg/kg mitomycin-C increased the number of MNE observed at 72 h (P<0.03), the number of MNPCE at 48 h (P<0.01) and 72 h (P<0.006), the BE frequency at 72 h (P<0.05), and the frequency of BPCE at 48 and 72 h (P<0.001). While mitomycin-C appears to produce a parallel increase in MNPCE and BPCE frequencies, the MNE seemed to be a more sensitive indicator of genotoxicity than the BE. This suggests that evaluating BE and MNE in routine haematological analysis should be considered to evaluate environmental genotoxic exposure. Anomalies nucléaires des érythrocytes de perroquet (Aratinga canicularis) associées aux lésions génotoxiques Les anomalies nucléaires des érythrocytes, tels les micronuclei (MN) et les bourgeons nucléaires (BE), sont considérés être des marqueurs potentiels d'exposition génotoxique. Nous avons décrit précédemment la fréquence d'érythrocytes micronucléés spontanés (MNE) dans l'espèce Aratinga canicularis. Ici, nous avons utilisé cette espèce pour évaluer l'induction des MNE et des BE par la mitomycine-C. Les animaux ont reçu une injection intracoelomique de 0, 2, 3 ou 4 mg/kg de mitomycine-C, deux jours consécutifs. Une goutte de sang a été recueillie après 0, 24, 48 et 72 h, et des frottis colorés ont été utilisés pour compter les érythrocytes polychromatiques micronucléés (MNPCE) et les érythrocytes polychromatiques avec des bourgeons (BPCE)/1.000 érythrocytes polychromatiques. Le nombre de MNE et de BE pour 10.000 érythrocytes a également été compté. Les fréquences des MNPCE et des BPCE ont été évaluées à 24, 48, et 72 h après l'administration de la plus faible dose (P<0,03). A la dose de 3 mg/kg, la fréquence des MNPCE a augmenté à 48 et 72 h (P<0,04) alors que le nombre des BPCE a augmenté, mais pas significativement. L'administration de 4 mg/kg de mitomycine-C a augmenté le nombre des MNE observé à 72 h (P<0,03), le nombre des MNPCE à 48h (P<0,01) et à 72 h (P<0,006), la fréquence des BE à 72 h (P<0,05), et la fréquence des BPCE à 48 et 72 h (P<0,001). Alors que la mitomycine-C apparaît produire une augmentation parallèle des fréquences des MNPCE et des BPCE, les MNE paraissent être un indicateur plus sensible de la génotoxicité que les BE. Ceci suggère que l'évaluation des BE et des MNE lors des analyses hématologiques de routine devrait être prise en compte pour évaluer l'exposition génotoxique environnementale. Kernanomalien in Erythrozyten von Papageien (Aratinga canicularis) im Zusammenhang mit genotoxischer Schädigung Nukleäre Anoomalien in Erythrozyten wie Mikronuklei (MN) und Kernknospen (-anlagen) (BE) werden als potentielle Biomarker für eine genotoxische Exposition angesehen. Kürzlich haben wir die Häufigkeit spontan auftretender Mikronuklei in Erythrozyten (MNE) in der Spezies (Aratinga canicularis, Orangenbrustsittich) beschrieben. In dieser Studie haben wir diese Spezies verwendet, um die Induktion von MNE und BE durch Mitomycin-C zu untersuchen. Den Tieren wurde an zwei aufeinanderfolgenden Tagen eine Injektion von 0, 2, 3, oder 4 mg/kg Mitomycin-C in die Leibeshöhle gegeben. Nach 0, 24, 48 und 72 h wurde ein Tropfen Blut entnommen, ausgestrichen und gefärbt, um polychromatische Erythrozyten mit Mikronuklei (MNPCE) und polychromatische Erythrozyten mit Knospen (BPCE)/ 1000 polychromatische Erythrozyten auszuzählen. Die Zahl der MNE und BE in insgesamt 10000 Erythrozyten wurde auch bestimmt. 24, 48 und 72 h nach der Verabreichung war bei der niedrigen Dosierung die Häufigkeit von MNPCE und BPCE erhöht (p < 0,03). Bei der Dosis von 3 mg/kg stieg nach 48 und 72 h die Frequenz der MNPCE signifikant (p < 0,04) und der BPCE jedoch nicht signifikant an. Die Gabe von 4 mg/kg Mitomycin-C steigerte die Zahl der MNE nach 72 h (p < 0,03), die Zahl der MNPCE nach 48 (p < 0,01) und 72 h (p < 0,06), die BE-Häufigkeit nach 72 h (p < 0,05 und die BPCE-Frequenz nach 48 und 72 h (p < 0,001). Während Mitomycin-C einen parallelen Anstieg der MNPCE- und BPCE-Häufigkeiten hervorzurufen scheint, sieht es so aus, als ob MNE ein sensitiverer Indikator für eine Genotoxizität als BE ist. Dies suggeriert, dass die Bewertung von BE und MNE in der hämatologischen Routineanalyse zur Bestimmung von genotoxischen Umweltrisiken berücksichtigt werden sollte. Anormalidades del núcleo de eritrocitos de loros (Aratinga canicularis) relacionadas con daño genotóxico Las anormalidades nucleares en eritrocitos, como los micronúcleos (MN) y las protuberancias nucleares (BE), se consideran biomarcadores potenciales de exposición genotóxica. Previavemente, hemos descrito la frecuencia espontánea de eritrocitos micronucleados (MNE) en las especies de Aratinga canicularis. En este estudio, hemos utilizado estas mismas especies para valorar la inducción de MNE y BE por mitomicina-C. Los animales recibieron una única inyección intracelómica de 0, 2, 3 o 4 mg/kg de mitomicina-C en dos días consecutivos. Se obtuvo una gota de sangre tras 0, 24, 48 y 72h, y se utilizaron frotis teñidos para el recuento de eritrocitos policromáticos micronucleados (MNPCE) y eritrocitos policromáticos con protuberancias (BCPE)/1000 eritrocitos policromáticos. También se realizó un recuento del número de MNE y BE en un total de 10,000 eritrocitos. Las frecuencias de MNPCE y BPCE estaban incrementadas a las 24, 48 y 72h tras la administración de la dosis más baja (P<0.03). A la dosis de 3 mg/kg, la frecuencia de MNPCE aumentó a las 48 y 72 h (P<0.04) mientras que el número de BPCE aumentó, aunque no de manera significativa. La administración de 4 mg/kg de mitomicina-C produjo un incremento del número de MNE observados a las 72 h (P<0.03), del número de MNPCE a las 48 (P<0.01) y 72 h (P<0.006), de la frecuencia de BE a las 72 h (P<0.05), y de la frecuencia de BPCE a las 48 y 72 h (P<0.001). Mientras que la mitomicina-C induce un incremento paralelo de las frecuencias de MNPCE y BPCE, los MNE pueden ser un indicador más sensible de la genotoxicidad que los BE. Estos resultados sugieren que debería considerarse la valoración de los BE y MNE en los análisis hematológicos rutinarios como indicadores de la exposición genotóxica ambiental.