Nota de Investigación- La flagelina aumenta la inmunogenicidad de una vacuna subunitaria que contiene lipoprote'ına E de Pasteurella multocida. La enfermedad del cólera aviar, causada por la infección por Pasteurella multocida, representa desaf'ıos para la prevención debido a sus numerosos serotipos. Actualmente, las bacterinas se utilizan ampliamente para la vacunación contra el cólera aviar, pero la protección se limita a cepas homólogas. Las vacunas vivas atenuadas de P. multocida proporcionan cierta protección heteróloga, pero los efectos secundarios son considerables. Recientemente, el uso de ant'ıgenos basados en prote'ınas parece ser prometedor como vacunas subunitarias cuando se ha abordado el problema de su baja inmunogenicidad con adyuvantes eficaces. La flagelina bacteriana se ha considerado ampliamente como un adyuvante prometedor para las vacunas. En este estudio, se analizó la capacidad como adyuvante de la flagelina en una vacuna de subunitaria contra P. multocida en modelos de ratones y pollos. Para la formulación de la vacuna, el ant'ıgeno fPlpE (liporote'ına E de P. multocida) se combinó con fFliC (flagelina de Salmonella Typhimurium). Las prote'ınas recombinantes de fPlpE y fFliC se expresaron con éxito utilizando el sistema de E. coli con los tamaños esperados de 55 kDa y 70 kDa, respectivamente. El fFliC indujo fuertes niveles de expresión de citoquinas proinflamatorias (IL-1β, IL-8 e IL-6) cuando se estimuló en células mononucleares de sangre periférica de pollos nativos. La inmunización de ratones y pollos con las vacunas subunitarias que contienen fFliC aceleró la respuesta de anticuerpos. En las pruebas de desaf'ıo, la fFliC aumentó la eficacia protectora de la vacuna contra la cepa heteróloga de P. multocida A1 y la cepa altamente virulenta Chu01 en ratones y pollos, respectivamente. Estos datos indicaron posibilidades potenciales de utilizar fFliC como adyuvante inmunoestimulante en el desarrollo de una vacuna subunitaria contra el cólera aviar.

The nuclear factor-kappa B (NF-κB) signaling pathway plays a crucial role in regulating immune responses in epithelial cells. In this study, we established a porcine epithelial NF-κB reporter cell line (PK15-KBR) as an in vitro platform to screen plant-based extracts for their potential use as vaccine adjuvants against porcine epidemic diarrhea virus (PEDV). The NF-κB inducers were further tested for toxicity assessments, either using CCK-8 assays or intramuscular injection in mice, finally followed by vaccination studies to evaluate their adjuvancy. Initial experiments confirmed that TNF-α effectively activated NF-κB signaling in PK15-KBR cells in a dose-dependent manner, validating the platform’s reliability at Z’ value of 0.68. Of the 224 testers, 3 candidates, including chamomile, mulberry and Boerhaavia diffusa, showed induction activity; however, only chamomile induced a dose-dependent response in PK15-KBR cells. As a proof of concept, chamomile, used as an adjuvant in oral vaccination, demonstrated significantly higher IgG levels at an early stage (day 14, p < 0.05) and enhanced IgA titers. These findings highlight the use of the PK15-KBR cell line in identifying mucosal adjuvants and position chamomile extract as a promising candidate for enhancing vaccine-induced immunity.