The aim of this study was to determine whether and how pan-CD44 protein expression in leukoplakia tissues correlates with positive SolCD44 test presence and their role in oral leukoplakia. SolCD44 and total protein expression in saliva were determined using an OncAlert^® Oral Cancer Rapid test. Comparison of paired associations of total protein, SolCD44, mean number of CD44 expressed epithelial layers in leukoplakia tissue, and macrophages below the basement membrane between control group and patients with leukoplakia showed statistically significant results (p < 0.0001). It is shown that the total protein indicates low or elevated risk of possible malignant transformation processes in leukoplakia. Statistically significant differences between higher total protein level and clinical forms of oral leukoplakia (p < 0.0001), as well as CD44-labeled epithelial cell layer decrease (p < 0.0001), were found. This possibly points to the onset of the stemness loss in leukoplakia tissue. CD9 antigen expression in the exosomes of the oral epithelium explained the intercellular flow of SolCD44 and other fluids in the leukoplakia area. We conclude that the OncAlert^® Oral Cancer Rapid test is a valuable screening method in daily clinical practice, in terms of complementing clinical diagnostics methods and to assess the potential for early malignancy.

Oral lichen planus (OLP) is considered a T cell-mediated chronic inflammatory process activated by an unknown antigen, making basal keratinocytes vulnerable to a cytotoxic cell mediated immune response. The aim of this review is to summarize information on the role and pathways of Epstein–Barr virus (EBV) and immune cells in inducing OLP as an autoimmune lesion. The pathogenesis of OLP is analyzed from immunological aspects of interactions between EBV and oral mucosa. The results of the available studies allow us to assume that EBV can act both as an exogenous and an endogenous antigen in the pathogenesis of OLP. We emphasized the role of antigen-presenting cells (APC), such as dendritic cells (Langerhans cells, LC), in detecting and capturing antigens and modulating the adaptive immune response. Although EBV shows tropism for B cells and epithelial cells, under certain conditions it can infect monocytes, LCs, NK, and T lymphocytes. It means that under some circumstances of the chronic inflammatory process, EBV particles can react as endogenous agents. During the development of the autoimmune process, a decisive role is played by the loss of immune tolerance. Factors like the activity of cytokines, chemokines, and autoantibodies secreted by EBV-positive plasma cells, autoantigens formed due to virus protein mimicry of human proteins, new self-peptides released from damaged tissues, self-reactive B and T cells, dysregulation of LC function, the anti-apoptotic effect of EBV early lytic antigens, and an imbalance between inflammatory and anti-inflammatory immune cells facilitate the development of an autoimmune process.

Mutes leikoplakija (ML) ir viena no visbiežāk sastopamām mutes potenciāli ļaundabīgām slimībām, kuru populācijā novēro apmēram 3,41–11,74 % cilvēku, taču ne visas leikoplakijas pārvēršas ļaundabīgos audzējos. Biežākie mutes ļaundabīgu audzēju cēloņi ir smēķēšana, alkohola lietošana un CPV (cilvēka papilomas vīruss) infekcija. Pēdējos gados Latvijā jaunieši arvien vairāk lieto bezdūmu tabaku, kas arī var būt iemesls priekšvēža un ļaundabīgu audzēju attīstībā. Epitēlija displāzijas novērtēšanu uzskata par ļaundabīgas transformācijas riska noteikšanas “zelta standartu”. Lai izprastu sarežģīto malignizācijas procesu mutes gļotādā, ir nepieciešami kompleksi imūnhistoķīmiski, elektronmikroskopiski, ģenētiski un imunoloģiski pētījumi. Mūsu pētījumā tika kombinēti klīniski, laboratoriski un imūnhistoķīmiski izmeklējumi, izvērtējot epitēlija cikla regulatora p27 un transkripcijas proteīna ThPOK, kā arī cilmes šūnu CD44 un eksosomu CD9 antigēnus. Darba mērķis bija novērtēt dažādu veidu mutes dobuma leikoplakiju klīniskās, morfoloģiskās un imūnhistoķīmiskās pārmaiņas vienlaikus ar siekalu testa rādītājiem, lai noteiktu mutes leikoplakijas agrīnas malignizācijas pazīmes. Pētījumā tika iekļauti 50 mutes leikoplakijas pacienti un 2 salīdzinošās grupas – 20 slimnieki ar mutes dobuma plakanšūnu karcinomu un 20 personas ar neizmainītu mutes dobuma gļotādu. Visās pacientu grupās tika veikta VELscope attēlu izvērtēšana, kā arī šķīstošā CD44 un kopējā proteīna noteikšana siekalās. Veselajos audos, ML un plakanšūnu karcinomas audiem veica rutīno morfoloģisko novērtējumu. CD44, CD9, ThPOK un p27 proteīni tika novērtēti ar standarta uz polimēriem balstītu vizualizācijas En-vision metodi. Iegūto rezultātu novērtēšanai tika veikta statistiskā datu analīze, izmantojot GraphPadPrism 9.0 programatūru MacOS (GraphPad Software, Sandjego, CA, ASV). Visiem statistiskajiem testiem p vērtības < 0,05 tika uzskatītas par nozīmīgām. Rezultāti tiek parādīti kā mediāna ar starpkvartiļu diapazonu. Izanalizējot iegūtos rezultātus, secināts, ka mūsu pētījuma grupā ML biežāk novēroja vīriešiem ar vidējo vecumu 57 gadi. Vidējais ML izmērs bija 14 ± 3,7 mm, un biežākā lokalizācija bija vaigu un mēles sāna gļotāda, 26 % gadījumu bija ar smagas pakāpes displāziju. Tika secināts, ka VELscope fluorescentā spektroskopija deva iespēju izvērtēt un noteikt izmainīto audu robežas gan ML, gan karcinomu gadījumos, tādējādi precizējot biopsijas vietas un rezekcijas līniju noteikšanu. Pieaugot mutes leikoplakiju klīniskās formas smagumam, siekalu kopējā proteīna līmeņa paaugstināšanās kombinācijā ar pozitīvu šķīstošo CD44 testu liecina par epitēlija agrīnām mikrovides izmaiņām. Mūsu pētījums pierādīja adhēzijas molekulas CD44 ekspresiju gan ML hiperplastiskajās un displastiskajās vietās, gan karcinomās. CD44 antigēna klātbūtne mutes zemgļotādas makrofāgos liecina par tā piedalīšanos epiteliāli mezenhimālās aktivitātēs kā hialuronais receptora proteīns. CD9 glikoproteīna ekspresija eksosomās pierādīja mutes epitēlijā tā sauktos transporta proteīnus un palīdzēja izprast siekalu un citu šķidrumu transportu gļotādā un tās patoloģiskajos veidojumos. p27 proteīns uzrādīja supresora un onkogēna īpašības nehomogēnajās ML un mutes plakanšūnu karcinomās, demonstrējot šī antigēna duālās īpašības ar p27 restrukturizāciju no kodola uz citoplazmu. ThPOK lielā ekspresijas dažādība mutes leikoplakijās un karcinomās nosaka to, ka nevaram šo biomarķieri rekomendēt mutes leikoplakiju malignizācijas procesu izpētē. Biezas leikoplakijas ar smagas pakāpes displāziju, CD44, CD9 un p27 proteīnu translokāciju un šķīstošā CD44 un kopējā proteīna daudzuma paaugstināšanās siekalās raksturo nehomogēnu mutes leikoplakiju kā augsta riska potenciāli ļaundabīgu veidojumu mutes dobumā. Promocijas darbs izstrādāts ar Eiropas sociālā fonda projekta Nr. 8.2.2.0/I/004 “Atbalsts doktorantu iesaistei zinātniski pētnieciskajā un studiju darbā” finansiālu atbalstu. Promocijas darbs izstrādāts Rīgas Stradiņa universitātē, Latvijā. Aizstāvēšana: Klīniskās medicīnas promocijas padomes atklātā sēdē 2024. gada 2. decembrī plkst....

Oral leukoplakia (OL) is one of the most common potentially malignant oral diseases observed in about 3.41–11.74 % of the population, however not all leukoplakias turn into carcinoma. The most common causes of oral malignancies are smoking, alcohol consumption, and HPV infection. In recent years, more and more smokeless tobacco has been used in Latvia, which can also be a reason for the development of pre-cancer and oral carcinoma. Evaluation of epithelial dysplasia is considered as the “gold standard” for the detection of the risk of malignant transformation. Complex immunohistochemical, electron microscopic, genetic, and immunological investigations are necessary for deeper understanding the complicated process of malignisation in the oral mucosa. In our study there are combined clinical, laboratory and immunohistochemical examinations of oral leucoplakias. We have analysed the epithelial cycle regulator p27, transcriptional protein ThPOK, as well as antigens of stem cell membranes CD44 and exosomes CD9. The aim of the study was to evaluate the clinical, morphological and immunohistochemical changes of different types of oral leukoplakia simultaneously with saliva test indicators to determine early signs of malignant transformation oral leukoplakia. The study included 50 oral leukoplakia patients and 2 comparative groups – 20 patients with oral squamous cell carcinoma and 20 persons with healthy oral mucosa. All patients underwent VELscope imaging, as well as determination of soluble CD44 and total protein in saliva. Morphological assessment was performed on healthy tissue, OL and squamous cell carcinoma tissue. CD44, CD9, ThPOK and p27 proteins were evaluated by the standard polymer-based visualisation En-vision method. To evaluate the obtained results, statistical data analysis was performed using GraphPadPrism 9.0 software for MacOS (GraphPad Software, San Diego, CA, USA). For all statistical tests, p values < 0.05 were considered significant. Results are presented as median with interquartile range. We concluded that in our study group, OL was more often observed in men with an average age of 57 years. The mean OL size was 14 ± 3.7 mm and the most frequent localisation was the mucous membrane of the cheeks and the side of the tongue, 26 % of all OL cases had severe dysplasia. VELscope fluorescent spectroscopy provided an opportunity to evaluate and determine the borders of the altered tissue in both OL and carcinoma cases, thereby clarifying the determination of the biopsy site and resection lines. As the severity of the clinical form of oral leukoplakia increases, the increase in salivary total protein level in combination with a positive soluble CD44 test was detected and it indicates about early changes in the epithelial microenvironment. Our study demonstrated the expression of the adhesion molecule CD44 in both hyperplastic and dysplastic areas of OL, as well as in carcinomas. The presence of CD44 antigen in the macrophages of the oral submucosa proved its participation of a hyaluronic receptor protein in epithelial-mesenchymal activities. The expression of CD9 glycoprotein in exosomes demonstrated the so-called transport proteins in the oral epithelium and helped to understand the transport of saliva and other fluids in the healthy mucosa and its pathological lesions. p27 protein showed suppressor and oncogene features in non-homogeneous OL and oral squamous cell carcinoma, demonstrating the dual properties of this antigen with nuclear-to-cytoplasmic translocalisation of p27. The great variety of expression of ThPOK in oral leukoplakias and cancers determines that we cannot recommend this biomarker in the study of malignancy processes of oral leukoplakias. Thick leukoplakia with severe dysplasia, translocation of CD44, CD9 and p27 proteins and elevated numbers of soluble CD44 and total protein in saliva characterize non-homogeneous oral leukoplakia as a high-risk potentially malignant formation in the oral cavity. The Doctoral Thesis has been developed with financing from the European Social Fund and Latvian state budget within the project No 8.2.2.0/20/I/004 “Support for involving doctoral students in scientific research and studies” at Rīga Stradiņš University. The Doctoral Thesis was developed at Rīga Stradiņš University, Latvia Defence: at the public session of the Promotion Council of Clinical Medicine on 2 December 2024 at 13.30 in the Hippocrates Lecture Theatre, 16 Dzirciema Street, Rīga Stradiņš University and remotely via online platform Zoom. 3.2 Clinical Medicine; Sub-Sector – Dentistry. Keywords: oral leukoplakia; VELscope; SolCD44; CD44; CD9; ThPOK; p27 antigenes.

Mutes leikoplakija (ML) ir viena no visbiežāk sastopamām mutes potenciāli ļaundabīgām slimībām, kuru populācijā novēro apmēram 3,41–11,74 % cilvēku, taču ne visas leikoplakijas pārvēršas ļaundabīgos audzējos. Biežākie mutes ļaundabīgu audzēju cēloņi ir smēķēšana, alkohola lietošana un CPV (cilvēka papilomas vīruss) infekcija. Pēdējos gados Latvijā jaunieši arvien vairāk lieto bezdūmu tabaku, kas arī var būt iemesls priekšvēža un ļaundabīgu audzēju attīstībā. Epitēlija displāzijas novērtēšanu uzskata par ļaundabīgas transformācijas riska noteikšanas “zelta standartu”. Lai izprastu sarežģīto malignizācijas procesu mutes gļotādā, ir nepieciešami kompleksi imūnhistoķīmiski, elektronmikroskopiski, ģenētiski un imunoloģiski pētījumi. Mūsu pētījumā tika kombinēti klīniski, laboratoriski un imūnhistoķīmiski izmeklējumi, izvērtējot epitēlija cikla regulatora p27 un transkripcijas proteīna ThPOK, kā arī cilmes šūnu CD44 un eksosomu CD9 antigēnus. Darba mērķis bija novērtēt dažādu veidu mutes dobuma leikoplakiju klīniskās, morfoloģiskās un imūnhistoķīmiskās pārmaiņas vienlaikus ar siekalu testa rādītājiem, lai noteiktu mutes leikoplakijas agrīnas malignizācijas pazīmes. Pētījumā tika iekļauti 50 mutes leikoplakijas pacienti un 2 salīdzinošās grupas – 20 slimnieki ar mutes dobuma plakanšūnu karcinomu un 20 personas ar neizmainītu mutes dobuma gļotādu. Visās pacientu grupās tika veikta VELscope attēlu izvērtēšana, kā arī šķīstošā CD44 un kopējā proteīna noteikšana siekalās. Veselajos audos, ML un plakanšūnu karcinomas audiem veica rutīno morfoloģisko novērtējumu. CD44, CD9, ThPOK un p27 proteīni tika novērtēti ar standarta uz polimēriem balstītu vizualizācijas En-vision metodi. Iegūto rezultātu novērtēšanai tika veikta statistiskā datu analīze, izmantojot GraphPadPrism 9.0 programatūru MacOS (GraphPad Software, Sandjego, CA, ASV). Visiem statistiskajiem testiem p vērtības < 0,05 tika uzskatītas par nozīmīgām. Rezultāti tiek parādīti kā mediāna ar starpkvartiļu diapazonu. Izanalizējot iegūtos rezultātus, secināts, ka mūsu pētījuma grupā ML biežāk novēroja vīriešiem ar vidējo vecumu 57 gadi. Vidējais ML izmērs bija 14 ± 3,7 mm, un biežākā lokalizācija bija vaigu un mēles sāna gļotāda, 26 % gadījumu bija ar smagas pakāpes displāziju. Tika secināts, ka VELscope fluorescentā spektroskopija deva iespēju izvērtēt un noteikt izmainīto audu robežas gan ML, gan karcinomu gadījumos, tādējādi precizējot biopsijas vietas un rezekcijas līniju noteikšanu. Pieaugot mutes leikoplakiju klīniskās formas smagumam, siekalu kopējā proteīna līmeņa paaugstināšanās kombinācijā ar pozitīvu šķīstošo CD44 testu liecina par epitēlija agrīnām mikrovides izmaiņām. Mūsu pētījums pierādīja adhēzijas molekulas CD44 ekspresiju gan ML hiperplastiskajās un displastiskajās vietās, gan karcinomās. CD44 antigēna klātbūtne mutes zemgļotādas makrofāgos liecina par tā piedalīšanos epiteliāli mezenhimālās aktivitātēs kā hialuronais receptora proteīns. CD9 glikoproteīna ekspresija eksosomās pierādīja mutes epitēlijā tā sauktos transporta proteīnus un palīdzēja izprast siekalu un citu šķidrumu transportu gļotādā un tās patoloģiskajos veidojumos. p27 proteīns uzrādīja supresora un onkogēna īpašības nehomogēnajās ML un mutes plakanšūnu karcinomās, demonstrējot šī antigēna duālās īpašības ar p27 restrukturizāciju no kodola uz citoplazmu. ThPOK lielā ekspresijas dažādība mutes leikoplakijās un karcinomās nosaka to, ka nevaram šo biomarķieri rekomendēt mutes leikoplakiju malignizācijas procesu izpētē. Biezas leikoplakijas ar smagas pakāpes displāziju, CD44, CD9 un p27 proteīnu translokāciju un šķīstošā CD44 un kopējā proteīna daudzuma paaugstināšanās siekalās raksturo nehomogēnu mutes leikoplakiju kā augsta riska potenciāli ļaundabīgu veidojumu mutes dobumā. Promocijas darbs izstrādāts ar Eiropas sociālā fonda projekta Nr. 8.2.2.0/I/004 “Atbalsts doktorantu iesaistei zinātniski pētnieciskajā un studiju darbā” finansiālu atbalstu. Promocijas darbs izstrādāts Rīgas Stradiņa universitātē, Latvijā. Aizstāvēšana: Klīniskās medicīnas promocijas padomes atklātā sēdē 2024. gada 2. decembrī plkst....

Sciendo provides publishing services and solutions to academic and professional organizations and individual authors. We publish journals, books, conference proceedings and a variety of other publications.