Diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) is the most common non-Hodgkin lymphoma in adults and reveals distinct genetic and metabolic signatures. NF-κB transcription factor family is involved in diverse biological processes enabling tumor development and resistance to anticancer-therapy through activation of its two main pathways, the canonical and the alternative NF-κB pathways, the main actor of the latter being the RelB NF-kB subunit. RelB DNA binding activity is frequently activated in DLBCL patients and cell lines. RelB activation defines a new DLBCL subgroup with dismal outcome upon immunochemotherapy, and RelB confers DLBCL cell resistance to DNA damage. However, whether RelB can impact on DLBCL cell metabolism and survival upon metabolic stress is unknown. Here, we reveal that RelB controls DLBCL oxidative energetic metabolism. Accordingly, RelB inhibition reduce DLBCL mitochondrial ATP production, and sensitizes DLBCL cells to apoptosis induced by Metformin and L-asparaginase (^®Kidrolase), two FDA approved antimetabolic drugs targeting mitochondrial metabolism. RelB also confers DLBCL cell resistance to glutamine deprivation, an essential amino acid that feeds the TCA cycle. Taken together, our findings uncover a new role for RelB in the regulation of DLBCL cell metabolism and DLBCL cell survival upon metabolic stress.

Background/Objectives: Diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) is the most common type of non-Hodgkin lymphoma, characterized by aggressive and heterogeneous tumors originating from B-cells. Especially in patients with relapsed or refractory (R/R) disease, DLBCL remains a challenging cancer to treat. Metabolic reprogramming is a hallmark of malignant cells. Our research focuses on developing strategies to enhance clinical outcomes for R/R DLBCL patients by targeting metabolic vulnerabilities. Methods: We investigated the effects of combining metformin and L-asparaginase, two FDA-approved antimetabolic drugs, on DLBCL cell metabolism and survival. Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy was employed to assess metabolic disturbances induced by the drug combination. The impact on lipid metabolism, glycolysis, glutaminolysis, the tricarboxylic acid (TCA) cycle, and antioxidant responses was examined. Induction of apoptosis was evaluated by FACS analysis. Results: The combination of metformin and L-asparaginase strongly sensitized DLBCL cells to apoptosis, independently of their oxidative phosphorylation (OxPhos) or BCR/glycolytic status. NMR spectroscopy revealed that this combination induces broader metabolic disturbances than either drug alone. It disrupts lipid metabolism by altering levels of phospholipids, cholesterol, and fatty acids. Additionally, it counteracts the pro-glycolytic effect of metformin, decreases glycolysis, and reduces glutaminolysis. It also affects the TCA cycle and antioxidant responses, critical for cellular energy production and redox balance. Furthermore, this combination interferes with two key cancer survival pathways, mTORC1 and MAPK signaling. Importantly, proof of principle for its beneficial effect was demonstrated in DLBCL patients. Conclusions: Combining metformin and L-asparaginase affects DLBCL cell survival by targeting multiple metabolic pathways and may represent a novel therapeutic approach for R/R DLBCL patients.

Etude des dérégulations du métabolisme et du rôle de la sous unité NF-kB RelB dans les lymphomes diffus à grandes cellules B: Le lymphome diffus à grandes cellules B (LDGCB) est le lymphome non-hodgkinien agressif le plus commun et qui présente des anomalies récurrentes de régulateurs de la voie canonique de NF-kB. Cette famille de facteur de transcription régule plusieurs processus biologiques tels que la croissance cellulaire, l'apoptose, le développement tumoral, les réponses immune et inflammatoire. Certaines évidences démontrent une altération de plusieurs voies métaboliques dans les cellules cancéreuses et les LDGCB ont été démontrés comme étant métaboliquement très actifs. Par ailleurs, la voie canonique de NF-kB joue un rôle crucial dans le contrôle de la reprogrammation métabolique dans les cancers. Cependant, l'implication et la fonction de la voie alternative de NF-kB, dont le principal acteur est RelB, concernant le développement des LDGCB dans ce contexte métabolique reste encore inconnues. Dans cette étude, nous avons mis en évidence une activité de liaison à l'ADN fréquente et constitutive de RelB à la fois dans les sous-types ABC et GCB de patients atteints de LDGCB, ceci étant associé à un faible pronostic, et également un rôle anti-apoptotique de RelB en réponse à un stress génotoxique. D'autre part, nous avons démontré que la combinaison de drogues ciblant le métabolisme réduisait la survie des cellules de LDGCB, indépendamment de leurs caractéristiques génétiques et moléculaires. De plus, nous avons observé que RelB exerce son rôle de protecteur de mort cellulaire lors de dérégulations métaboliques probablement via le contrôle de l'expression de cIAP2 entre autre. Finalement, l'ensemble de ces résultats permet d'envisager un rôle de RelB en tant que biomarqueur pronostic important et met donc en évidence l'intérêt de considérer l'impact de cette sous-unité dans l'élaboration de nouvelles stratégies thérapeutiques afin d'apporter un bénéfice clinique au patients atteints de LDGCB.