Мета. Дослідити стан мікробіоценозу ґрунту спонтанно відновлюваного фітоценозу 21-го року самозаростання за внесення мінеральних добрив у дозі N90P40K70 і двоукісного режиму використання. Методи. Експериментально-польовий, лабораторно-аналітичний, мікробіологічні, статистичні. Результати. Оптимізація мінерального живлення відновлюваного фітоценозу сприяє збільшенню чисельності мікроорганізмів: амоніфікаторів у 2,24 раза, іммобілізаторів мінерального азоту — у 1,39, денітрифікаторів — у 3,19, нітрифікаторів — у 1,71, целюлозоруйнівних — у 1,64, актиноміцетів — у 1,17, мікроміцетів — у 1,20, мобілізаторів органофосфатів — у 1,33 раза. Внаслідок застосування двохукісного режиму використання трав’янистих ценозів чисельність мікроорганізмів більшості досліджених груп не змінюється, за винятком денітрифікаторів, целюлозоруйнівних бактерій, мікроміцетів і мобілізаторів органофосфатів. Застосування мінеральних добрив призводить до уповільнення мінералізаційних процесів у ґрунті: індекс педотрофності зменшується в 2,28 раза, коефіцієнт мінералізації сполук азоту — в 1,60, оліготрофності — в 2,25, активність мінералізації гумусу — в 1,65 раза. Відчуження рослинної біомаси несуттєво впливає на перебіг мікробіологічних процесів у ґрунті: індекс педотрофності зростає на 18,2 %, коефіцієнт оліготрофності — на 3,63 %, коефіцієнт мінералізації сполук азоту зменшується на 6,6 %, активність мінералізації гумусу — на 6,2 %. Висновки. Нестача мінеральних елементів у ґрунті перелогу провокує інтенсифікацію мінералізаційних процесів, а оптимізування мінерального живлення рослин фітоценозу сприяє їх уповільненню. Зниження сумарної біологічної активності й підвищення фітотоксичності ґрунту за двоукісного використання травостоїв свідчить про початок процесів виснаження ґрунту.