Amaç: Bortezomib, multipl miyelom tedavisinde yaygın olarak kullanılan önemli bir proteazom inhibitörüdür; ancak kazanılmış direnç, ilacın uzun dönem klinik etkinliğini sınırlandırmaktadır. MikroRNA’lar apoptoz, stres yanıtı, hücresel adaptasyon ve ilaç direnci süreçlerinde rol oynayan önemli post-transkripsiyonel düzenleyicilerdir. Bu çalışmada, multipl miyelom hücre modellerinde bortezomib direnci ile ilişkili olabilecek seçilmiş mikroRNA’ların ekspresyon profillerinin araştırılması amaçlandı. Yöntem: Bortezomib dirençli U266 ve RPMI-8226 multipl miyelom hücreleri, artan konsantrasyonlarda bortezomibe sürekli maruz bırakılarak oluşturuldu. Dirençli ve kontrol hücrelerinde miR-25, miR-30c, miR-34a, miR-34c, miR-200b, miR-200c, miR-326, miR-429, miR-449a, miR-449b, miR-499a, miR-582 ve miR-708 ekspresyon düzeyleri kantitatif gerçek zamanlı PCR yöntemi ile analiz edildi. Endojen kontrol olarak U6 snRNA kullanıldı ve relatif ekspresyon düzeyleri 2⁻ΔΔCt yöntemi ile hesaplandı. Bulgular: Bortezomib dirençli U266 ve RPMI-8226 hücrelerinde hem ortak hem de hücre hattına özgü mikroRNA ekspresyon değişiklikleri gözlendi. miR-34a, miR-34c, miR-326, miR-429, miR-449a ve miR-449b her iki dirençli hücre hattında da anlamlı olarak yüksek eksprese edildi. miR-25, miR-200c ve miR-708 ekspresyonları yalnızca dirençli RPMI-8226 hücrelerinde arttı. Buna karşılık, miR-200b, miR-499a ve miR-582 iki dirençli model arasında zıt ekspresyon paternleri sergilerken, miR-30c ekspresyonunda değişiklik saptanmadı. Sonuç: Multipl miyelomda kazanılmış bortezomib direnci, hem ortak hem de hücre hattına özgü mikroRNA değişiklikleri ile ilişkilidir. miR-34, miR-326 ve miR-449 aile üyelerinin her iki dirençli hücre hattında tutarlı şekilde artmış olması, bu mikroRNA’ların proteazom inhibisyonuna karşı gelişen adaptif yanıtlarda rol oynayabileceğini düşündürmektedir. Diğer mikroRNA’larda gözlenen farklı ekspresyon paternleri ise direnç mekanizmalarının heterojen yapısına işaret etmektedir. Bu mikroRNA’ların bortezomib direncindeki fonksiyonel rollerinin aydınlatılması için ileri çalışmalara ihtiyaç vardır.

Objective: The ubiquitin system plays a central role in regulating intracellular protein homeostasis and cellular signaling. E3 ubiquitin ligases, in particular, are key modulators of protein degradation and have been implicated in cancer progression, including breast cancer. DHRS2, a gene known to suppress MDM2 activity through its ubiquitin-binding domain, has recently emerged as a potential regulator in tumor biology. This study investigated how DHRS2 expression influences selected E3 ubiquitin ligase genes in breast epithelial cells.Materials and Methods: MCF-7 and MCF-10A cell lines were used. DHRS2 was either overexpressed using a vector-based system, or silenced via siRNA. After transfection, quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT–PCR) was performed to evaluate changes in the expression levels of BRCA1, BARD1, and STUB1.Results: In MCF-7 cells, DHRS2 overexpression induced a fourfold increase in BRCA1 expression, whereas STUB1 and BARD1 were downregulated (0.56-fold). In MCF-10A cells with naturally low DHRS2, STUB1 expression increased 1.5-fold after DHRS2 knockdown, and BARD1 expression correlated positively with DHRS2 levels.Conclusion: This study highlights a potential regulatory link between DHRS2 and key E3 ubiquitin ligases-BRCA1, BARD1, and STUB1. Differential patterns across cell types indicate DHRS2 as a context-dependent modulator of ubiquitin-mediated pathways, supporting its relevance in biomarker discovery and therapeutic targeting in breast cancer.

Breast cancer remains a leading cause of cancer-related mortality worldwide, with epigenetic mechanisms like N⁶ methyladenosine (m⁶A) modification playing a crucial role in tumorigenesis. The interaction between microRNAs and m⁶A regulators, such as the methyltransferase METTL14, is increasingly recognized as a key pathway in oncogenesis. This study investigated whether miR-30c-2-3p regulates METTL14 expression to influence global m⁶A levels and cell migration in breast epithelial (MCF12A) and breast cancer (MCF7) cell lines. Following transfection with miR-30c-2-3p mimics, successful overexpression was confirmed in both cell lines. Subsequent RT-qPCR and Western blotting analyses demonstrated that METTL14 mRNA and protein levels were significantly reduced at 24 and 48 h post-transfection (p < 0.05). Concurrently, global m⁶A RNA methylation levels decreased, with a more pronounced reduction observed in MCF12A cells (p < 0.001). Functionally, wound healing assays revealed that miR-30c-2-3p significantly inhibited migration, reducing wound closure by 30–44% in MCF7 cells and by 66–72% in MCF12A cells. These findings reveal a novel regulatory axis involving miR-30c-2-3p, METTL14, and m⁶A, suggesting that miR-30c-2-3p functions as a tumor suppressor and represents a promising biomarker and therapeutic target in breast cancer.