The avian infectious bronchitis virus is classified into serotypes or genotypes (or both) in different poultry-producing countries of the world. In Brazil, Massachusetts type (Mass), used as a live vaccine, and local field Brazilian variants (genotypes; BR) predominate in the commercial poultry flocks. This study describes the development and validation of two real-time reverse-transcription polymerase chain reactions (RT-qPCR) for the specific detection of Mass and BR genotypes in allantoic fluids and clinical samples. Genotype-specific primers, combined with a generic probe targeted to the S1 gene, originated Mass RT-qPCR and BR RT-qPCR–specific assays. Analytical sensitivity and linearity of these assays were determined in comparison with an IBV generic real-time RT-PCR based on the 5′ untranslated region (5′UTR RT-qPCR). Mass RT-qPCR detected five Mass field isolates, three vaccine samples, and one coinfected sample (BR and Mass) while BR RT-qPCR detected 16 BR field isolates. Both assays were linear (R2 > 0.98), reproducible, and as sensitive as the classical 5′UTR RT-qPCR used to detect IBV. In the analysis of 141 IBV clinical samples, 8 were positive for Mass RT-qPCR, 76 for BR RT-qPCR, and 2 for both assays. In the remaining 55 samples, 25 were positive only for 5′UTR RT-qPCR and 30 were negative for the three assays. In conclusion, both assays were able to detect Mass and BR genotypes, allowing rapid and easy IBV molecular typing from allantoic fluids and clinical samples. Un método de transcripción reversa y reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real para la diferenciación de vacunas tipo Massachusetts y genotipos de campo brasileros del virus de la bronquitis infecciosa aviar. El virus de la bronquitis infecciosa aviar se clasifica en serotipos o genotipos (o en ambos) en diferentes países productores avícolas en el mundo. En Brasil, el tipo Massachusetts (Mass), utilizado como una vacuna viva, y variantes de campo locales brasileras (genotipos; BR) predominan en la avicultura comercial. Este estudio describe el desarrollo y la validación de dos métodos de transcripción reversa y reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-qPCR) para la detección específica de los genotipos Massachusetts y BR en líquidos alantoideo y en muestras clínicas. Mediante el uso de iniciadores específicos de genotipo en combinación con una sonda genérica dirigida al gene S1 se originaron dos ensayos RT-qPCR específicos para los genotipos Massachusetts y BR. Se determinaron la sensibilidad analítica y la linealidad de estos ensayos en comparación con un método genérico de RT-PCR en tiempo real basado en la región no traducida 5′(5′UTR RT-qPCR). El método RT-qPCR específico para Massachusetts detectó cinco aislamientos de campo tipo Mass, tres muestras de la vacuna, y una muestra coinfectada (BR y Mass), mientras que el método RT-qPCR específico para el genotipo BR detectó 16 aislamientos de campo tipo BR. Ambos ensayos fueron lineales (R2 > 0.98), reproducibles, y tan sensible como el método clásico para la región 5′UTR que se utiliza para detectar al virus de bronquitis infecciosa. En el análisis de 141 muestras clínicas, ocho fueron positivas mediante el método RT-qPCR específico para Mass, 76 mediante el método específico para genotipo BR y dos muestras fueron positivas mediante ambos ensayos. En las 55 muestras restantes, 25 fueron positivas sólo mediante el método dirigido a la región 5′UTR y 30 fueron negativos para los 3 ensayos. En conclusión, ambos ensayos fueron capaces de detectar genotipos Mass y BR, lo que permite una tipificación molecular para el virus de la bronquitis infecciosa más rápida y fácil a partir de fluidos alantoideo y de muestras clínicas.