The Middle American killifish genus Profundulus occurs in most Pacific and Atlantic drainages from the Mexican state of Guerrero to the Chamelecón River in Honduras, with highest species diversity in southern Mexico. In this study, we describe a new member of the genus, Profundulus parentiae, new species, from the Mexican state of Oaxaca. It is distinguished from P. guatemalensis and P. kreiseri by having rows of dots on the sides of the body. Profundulus parentiae, new species, can be distinguished from P. oaxacae by having 33 lateral scales, versus 29–31 in P. oaxacae. Profundulus parentiae, new species, can be distinguished from P. balsanus, P. oaxacae, and P. mixtlanensis by the presence of long epiotic processes that extend beyond the epipleural ribs of the first vertebra, versus short epiotic processes not reaching the epipleural ribs of the first vertebra. Profundulus parentiae, new species, can be differentiated from P. punctatus by the presence of a dorso-ventrally compressed Meckel's cartilage with a relatively straight medial process and a narrow and strongly concave sesamoid articular, versus a dorso-ventrally expanded Meckel's cartilage with concave medial process and a wide and moderately concave sesamoid articular. Based on the phylogenetic analysis of molecular sequence data, the new species is recovered as the sister taxon to P. balsanus. The discovery and description of this new species in southeastern Mexico, raises the number of species from this region to five and suggests that this area has been an important center for diversification within this lineage of killifishes. El género Profundulus son escamudos de América-Media que ocurren en la mayoría de cuencas del Pacifico y Atlántico, desde el estado de Guerrero hasta la zona central de Honduras, presentando los niveles más altos de diversidad en el sureste de México. En este estudio describimos un nuevo miembro de este género, Profundulus parentiae sp. nov., del estado de Oaxaca, Mexico. Se distingue de P. guatemalensis y P. kreiseri por tener líneas de puntos a los lados del cuerpo. Profundulus parentiae se puede distinguir de P. oaxacae por tener 33 escamas laterales, versus 29–31 en P. oaxacae. Profundulus parentiae sp. nov. se puede distinguir de P. balsanus, P. oaxacae y P. mixtlanensis por la presencia de un proceso epiotico alargado que se extiende por debajo de la costilla epipleural de la primera vertebra, versus un proceso epiotico corto que no llega a la costilla epipleural de la primera vertebra. Profundulus parentiae sp. nov. se puede diferenciar de P. punctatus por la presencia de un cartílago de Meckel comprimido dorso-ventralmente con un proceso medial relativamente recto y un angosto y fuertemente cóncavo sesamoideo articular, versus un cartílago de Meckel expandido dorso-ventralmente con un proceso medial cóncavo y un sesamoideo articular ancho y moderadamente cóncavo. Basados en los análisis filogenéticos con datos de secuenciaciones moleculares, la nueva especie se recobró como taxón hermano de P. balsanus. El descubrimiento y descripción de esta nueva especie in el sureste de México, aumenta el número de especies en esta región a cinco, y sugiere que esta área ha sido un importante centro para la diversificación para este linaje de escamudos.