During DST application, it can be challenging to evenly homogenize TB cell clumps with lipid-rich cell walls. These experiments must be carried out under Biosafety Level-3 (BSL-3) laboratory conditions with personal protective equipment and taking safety precautions because the procedures applied at this stage cause the formation of bacillus-laden aerosols and carry a serious risk of transmission.

This study investigates the potential antituberculosis activity of genistein, a soy-derived isoflavone, through its interaction with Toll-like receptor 2 (TLR2) using in-silico methods. Tuberculosis (TB), caused by Mycobacterium tuberculosis (Mtb), remains one of the deadliest infectious diseases globally, with rising cases of multidrug-resistant (MDR) and extensively drug-resistant (XDR) TB complicating treatment. TLR2 plays a critical role in the host immune response by recognizing Mtb cell wall components and activating signaling pathways that promote inflammation and bacterial clearance. Molecular docking studies demonstrated a strong binding affinity between genistein and TLR2, with a Vina score of -8.0 kcal/mol. Genistein interacted with key amino acid residues in the receptor's binding pocket, including ILE689, HIS697, TRP712, and ASP730. Further Absorption Distribution Metabolism Excretion (ADME) and toxicity predictions revealed that genistein undergoes extensive metabolism, generating 19 potential metabolites. Pharmacokinetic assays indicated that metabolites 7, 9, 15, 16, and 19 exhibited high Caco-2 cell line permeability, suggesting strong potential for oral bioavailability. However, metabolites 3, 5, 9, 13, 15, and 17 showed mutagenic potential in AMES tests, while metabolites 2, 5, 8, 10, 13, 15, and 17 displayed hepatotoxicity. Despite these risks, certain metabolites demonstrated favorable safety profiles, with LD50 values exceeding 2700 mg/kg. These findings suggest that genistein and its metabolites hold promise as complementary agents in TB treatment by modulating TLR2-mediated immune responses. However, further experimental validation and optimization are required to ensure efficacy and safety.

Tüberküloz (TB), dünya genelinde enfeksiyon kaynaklı hastalıklar arasında ölümün önde gelen nedenlerinden biri olan bulaşıcı bir hastalıktır. TB’nin epidemiyolojik dağılımına göre, yüksek oranda TB basili ile enfekte hastaların bulunduğu ülkelerin büyük bir bölümü orta ve düşük gelirli ülkelerdir. Bu nedenle çalışmada düşük gelirli ülkelerde ve laboratuvarlarda TB ve çok ilaca dirençli ( TB izolatlarının ilaç duyarlılık testleri için kolayca kullanılabilecek yeni bir besiyeri olan AYC.2.2 agar besiyerinin klinik izolatlarla etkinliğinin değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Çalışmada Mycobacterium tuberculosis ATCC 27294 (H37Rv, tüm ilaçlara duyarlı), ATCC 35822 (izoniazid dirençli), ATCC 35838 (rifampisin dirençli), ATCC 35820 (streptomisin dirençli) ve ATCC 35837 (etambutol dirençli) referans suşlar ve 34 klinik izolat test edilmiştir. Çalışmadaki tüm anti TB ilaçlar ve izolatlar için kullanılan referans yöntem ve AYC.2.2 agar kullanılarak yapılan agar proporsiyon metodu arasında duyarlılık, özgüllük, pozitif prediktif değer (PPD), negatif prediktif değer (NPD) ve uyum hesaplanmıştır. İzoniazid ve rifampisin için tüm değerler %100 bulunmuştur. Etambutol için duyarlılık %100, özgüllük %88.23, PPD %89.47, NPD %100, uyum %94 olarak hesaplanmıştır. Streptomisin için duyarlılık %100, özgüllük %77.77, PPD %80, NPD %100, uyum %88 bulunmuştur. M. tuberculosis ATCC suşları klinik izolatların değerlendirilmesine dahil edilmemiş ve bunlardaki uyum %100 bulunmuştur. Elde edilen sonuçlara göre, sıvı otomatize sistemlere oranla üreme süresi dezavantaj olmasına rağmen, AYC.2.2. agar duyarlılık sonuçlarının belirlenmesinde otomatik sistemler kadar etkili bir şekilde kullanılabilmiştir. Maliyetinin düşük olması ve hazırlanmasının kolay olması en büyük avantajlarındandır. Ancak, rutin kullanıma geçmeden önce çok merkezli çalışmalara ihtiyaç vardır.