The potential of immune-evasive mutation accumulation in the SARS-CoV-2 virus has led to its rapid spread, causing over 600 million confirmed cases and more than 6.5 million confirmed deaths. The huge demand for the rapid development and deployment of low-cost and effective vaccines against emerging variants has renewed interest in DNA vaccine technology. Here, we report the rapid generation and immunological evaluation of novel DNA vaccine candidates against the Wuhan-Hu-1 and Omicron variants based on the RBD protein fused with the Potato virus X coat protein (PVXCP). The delivery of DNA vaccines using electroporation in a two-dose regimen induced high-antibody titers and profound cellular responses in mice. The antibody titers induced against the Omicron variant of the vaccine were sufficient for effective protection against both Omicron and Wuhan-Hu-1 virus infections. The PVXCP protein in the vaccine construct shifted the immune response to the favorable Th1-like type and provided the oligomerization of RBD-PVXCP protein. Naked DNA delivery by needle-free injection allowed us to achieve antibody titers comparable with mRNA-LNP delivery in rabbits. These data identify the RBD-PVXCP DNA vaccine platform as a promising solution for robust and effective SARS-CoV-2 protection, supporting further translational study.

С целью выявления модуляторов активности тромбоксансинтазы человека осуществлен анализ взаимодействия рекомбинантного гемопротеида с различными низкомолекулярными лигандами. Показано, что тромбоксансинтаза взаимодействует с рядом жирных кислот и их производных (потенциальные субстраты или конкурентные ингибиторы), а также является мишенью для ингибирования производными имидазола и триазола, применяющимися в медицинской практике и сельском хозяйстве, что позволило установить механизм, по которому могут реализовывать свое токсическое действие соединения, нарушающие работу эндокринной системы человека (endocrine-disrupting chemicals, EDC). Впервые показано восстановление атома железа гема тромбоксансинтазы NАDPH-цитохром P450 редуктазой, что оказывает частичное ингибирующее действие на фермент и подавляет образование побочных продуктов реакции – 12-гидроксигептадекатриеноевой кислоты (12-HHT) и малонового диальдегида (МДА). Предполагается, что данный механизм может участвовать в регуляции активности фермента in vivo.

Протеомный анализ - высокоэффективный метод идентификации бактерий и определения содержания белка в прокариотических клетках при различных условиях роста бактериальной культуры. Однако данный подход практически не используется для характеристики продуцентов биологически активных веществ. Использование методов протеомного профилирования при изучении бактерий позволяет получить данные о метаболических процессах, протекающих в клетках прокариот, что дает возможность оптимизировать подходы к созданию продуцентов биологически значимых соединений. Целью данной работы было проведение протеомного профилирования мутантных штаммов бактерий P. chlororaphis subsp. aurantiaca, способных к сверхпродукции феназиновых антибиотиков, с помощью микробиологических и биохимических методов. B ходе проведения протеомного анализа штаммов-продуцентов феназиновых антибиотиков бактерий P. chlororaphis subsp. aurantiaca впервые было продемонстрировано достаточно раннее (в log-фазе) начало экспрессии отдельных генов phz-оперона, кодирующего ферменты синтеза феназинов. Наиболее высокое содержание белка PhzO, ген которого находится за пределами phz-оперона, было зарегистрировано для штамма дикого типа. Не обнаружено корреляции между содержанием данного белка и концентрацией продуктов реакции, которую он катализирует. Кроме того, выявлена общая тенденция штаммов-продуцентов к накоплению ферментов и белков, входящих в комплекс системы антиоксидантной защиты. У штаммов-продуцентов также отмечено существенное увеличение содержания белков, принимающих участие в репарации ДНК, и шаперонов, способствующих восстановлению нативной конформации белков.