Premature Ovarian Failure; is characterized by the dysfunction or early depletion of ovarian reserves due to follicular loss in the ovary in women under age of 40. POF is the important cause of infertility and its etiology is still not clearly understood. Investigation of cell death mechanisms (CDM) that play a role in the follicular atresia (FA) triggered by excessive loss of granulosa cells (GCs) that provide metabolic support for oocyte and follicle development in the ovary will help to understand POF etiology. It was known that apoptosis and autophagy play a role in FA. Recent studies have shown that paraptosis, associated with endoplasmic reticulum stress (ERS), also exist in FA. POF model was established in C57BL/6 female mice by CTX and it was confirmed by increased follicle stimulating hormone (FSH), luteal hormone (LH) and decreased estradiol (E2) blood levels and follicle count. According to the results of the immunohistochemistry (IHC) cell death markers were significantly more expressed than control (C) and sham (S) groups in the POF model. In addition, more apoptotic cells were observed in the POF group compared to C and S in the TUNEL analysis. In consequence of this study apoptosis and autophagy as well as paraptosis play a role in the FA leading to POF, will help to develop new treatment protocols.

Cyclophosphamide (CTX), also known as cytophosphane among other, is a medication used as chemotherapy and to suppress the immune system. The PI3K/AKT/mTOR pathway is involved in the regulation of diverse cellular functions, including cell growth, protein synthesis, cell cycle regulation, glucose metabolism, and motility. In our study eight weeks old C57BL/6 female mice were divided into 3 groups as control (C), sham (S) and experimental group. The experimental group has been established with CTX treatment. No treatment was applied to the C group. The S group were given an equal amount of saline. CTX was administered intraperitoneally one every 2 days for 3 weeks; the first dose was 70 mg/kg, the ongoing doses were 30 mg/kg. At the end of 3 weeks mice were sacrificed and kidneys were taken for investigation. In order to show the effect of cyclophosphamide in kidney tissue, the tissues were stained via indirect immunohistochemistry with PI3K, AKT and mTOR primary antibodies. In our study, PI3K, AKT and mTOR expression levels were found to be significantly decreased in CTX-mediated mechanisms indicating that the mechanisms of CTX might involve in the inhibition of PI3K/AKT/mTOR signaling pathway.

Giriş: Böbrek hücrelerinin elde edilmesinde kullanılan primer kültür yöntemi, böbrek hastalıklarının hücre düzeyinde değerlendirilmesi ve hücre fonksiyonlarının incelenmesi için olanak sağlamaktadır. Bu çalışmanın amacı böbrek primer kültürü için kullanılabilecek üç farklı izolasyon yönteminin hücre sağkalımı ve protol etkinliği açısından birbirleriyle karşılaştırılmasıdır. Gereç ve Yöntemler: Nefrektomi ile çıkarılan böbrek dokusu steril şartlarda mekanik, tripsin ve kollagenaz yöntemi ile ayrımlanarak podosit vasatı içerisinde kültüre edildi. Kültüre edilen hücrelerin podosin, vimentin, E-kaderin, TGF-β1, CD133, ZO-1 ve Nefrin dağılımlarının analizi immünositokimyasal yöntem ile yapıldı. Bulgular: Kollajenaz enzimatik yöntemi sonrasında hücrelerin kültürün 7. gününden itibaren, mekanik yöntemde ise 13. günden itibaren epiteloid karakter aldıkları gözlenirken, tripsin enzimatik yönteminde 13. günde kültürde artan fuziform yapıdaki hücreler gözlendi. Her üç yöntem ile böbrek dokusundan elde edilen podosit hücrelerin immunositokimyasal analizi sonrasında, elde edilen hücrelerde vimentin, E-kaderin, TGF-β, CD133, ZO-1 immunoreaktiviteleri farklılık gösterir iken, podosin ve nefrin immunoreaktivitelerinin kollajenaz enzimatik yöntemi ile elde edilen hücrelerde kuvvetli olduğu saptandı. Tartışma: Bu çalışmada, farklı proteinlerin immunositokimyasal boyamaları ile kontrol edilen böbrek hücreleri için üç farklı primer kültür teknikleri karşılaştırıldığında, kollajenaz ile muamele edilen böbrek dokusundan daha yüksek verimle hücre saflaştırılabildiği gözlendi. Podosit hücrelerinin kültüre edilmesinde hücre sağkalım verimi ve protokol etkinliği açısından kollajenaz yönteminin en uygun yöntem olduğu gösterildi.

Oosit matürasyonu prenatal dönemden puberteye kadar süren birçok proteinin karşılıklı etkileşimiyle kontrol edilen bir süreçtir. Matür oositin kalitesi ileri fertilizasyon ve implantasyon başarısını doğrudan etkileyerek kaliteli embriyo oluşumuna temel oluşturmaktadır. Oositin matürasyon süreci in vivo ve in vitro ortamlarda araştırma konularından biri olup günümüzde hem sürecin anlaşılması hem de kültür ortamındaki koşulların belirlenmesine yönelik çalışmalar devam etmektedir. N6-metiladenosin (m6A) en yaygın RNA modifikasyonlarından biridir. m6A metilasyonunda metil gruplarının eklenmesinden sorumlu metiltransferazlar (yazıcılar), metil gruplarının kaldırılmasından sorumlu dimetilazlar (siliciler) ve metil grubunu bağlayıcı proteinler (okuyucular) olmak üzere üç grup protein görev almaktadır. Son yıllarda kanser, metabolik hastalıklar gibi süreçlerde önemli rolleri olduğu kanıtlanan m6A metilasyonunun oogenez ve spermatogenez süreçlerindeki yeri ve önemi de yapılan çalışmalarla ortaya çıkarılmaktadır. Bu derlemede oosit matürasyonu ve m6A metilasyonunu tanımlanması, aralarındaki ilişkinin araştırılması ve sonuçta oosit matürasyonuna m6A metilasyonu ve/veya proteinlerinin direkt/indirekt etkilerinin tartışılması amaçlanmıştır.