El uso intensivo de macrólidos, como la azitromicina, durante la pandemia de COVID-19 ha favorecido el desarrollo de resistencia antimicrobiana en bacterias Grampositivas a través de múltiples mecanismos de resistencia, como la modificación del ARN ribosomal, bombas de expulsión e inactivación enzimática. Objetivo: Describir la prevalencia de genes de resistencia en bacterias aisladas de pacientes con COVID-19 en Santander, Colombia. Materiales y Métodos: Se realizó un estudio descriptivo de 112 muestras almacenadas de hisopados nasofaríngeos, orofaríngeos y aspirados traqueales de pacientes hospitalizados con COVID-19 en 2020, de las cuales se aislaron 48 cepas Grampositivas. La resistencia a macrólidos y la presencia de los genes ermA, ermB, ermT y mef(A/E) se evaluaron mediante pruebas fenotípicas y moleculares. Resultados:Staphylococcus aureus fue la especie más prevalente con un 58,33% (28), seguida de Staphylococcus epidermidis con un 31,25% (15). Un 47,92% (23) de las cepas mostró resistencia fenotípica a la azitromicina, y un 81,25% (39) resistencia genotípica, con predominancia de ermB con el 58,33% (28) y ermT con el 45,83% (22), sin detección de mef(A/E). Discusión: Estos hallazgos muestran una alta prevalencia de resistencia a macrólidos, lo cual puede estar relacionado con el uso extensivo de estos antibióticos durante la pandemia. Conclusiones: El aumento en la resistencia a macrólidos en bacterias Grampositivas representa un reto crítico para la salud pública, especialmente en el contexto de pandemias. Estos resultados subrayan la necesidad urgente de implementar medidas de control en el uso de antibióticos.

Background: Mpp46Aa1 (formerly PS2Aa1) is a β-pore-forming protein produced by Bacillus thuringiensis that exhibits selective cytotoxicity against cancer cells. Protein engineering has generated variants with improved antitumor activity, including the N65 variant, which contains three amino acid substitutions. Objective: In this study, three individual reversion variants of N65 were generated by site-directed mutagenesis to determine the contribution of each substitution to cytotoxicity, selectivity, and cell death mechanisms in the colorectal cancer cell lines SW480 and SW620 and the non-tumorigenic colonic epithelial cell line NCM460. Methods: Recombinant proteins were purified and evaluated using AlamarBlue viability assays, Annexin V/Cy3 staining, caspase-3/7 and caspase-9 activation assays, and JC-1 mitochondrial membrane potential analysis. Results: The reversion variants differentially affected the biological activity of N65. Among them, the D34N variant exhibited low IC₅₀ values against both colorectal cancer cell lines, while maintaining selectivity towards non-cancerous cells. D34N also induced phosphatidylserine externalization, activation of caspase-3/7 and caspase-9, and mitochondrial membrane depolarization, indicating activation of the intrinsic apoptotic pathway. Structural analyses revealed that the reverted residues modified local interaction networks, suggesting that these positions may influence CD59 recognition and contribute to cellular selectivity. Conclusions: These findings demonstrate that the three substitutions present in N65 contribute unequally to its biological activity and identify residue 34 as a key determinant of Mpp46Aa1 cytotoxicity. This study provides structural and functional insights that support the rational engineering of parasporins with enhanced antitumor selectivity.