This work aimed to determine the contribution of the testis and epididymis and the effect of the photoperiodic regimen on ram seminal plasma (SP). Semen was collected from 15 mature rams located in an equatorial (Colombian Creole and Romney Marsh, eight intact and two vasectomized) or a temperate climate (Rasa Aragonesa, three intact and two vasectomized). SP proteins were analyzed by Bradford, SDS-PAGE and difference gel electrophoresis (DIGE). Melatonin and testosterone concentrations were quantified by ELISA, and activity of glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GRD), and catalase by enzymatic assays. Vasectomy increased protein concentration and the intensity of high molecular weight bands (p < 0.001), with no differences between breeds. DIGE revealed the absence of six proteins in vasectomized rams: angiotensin-converting enzyme, lactotransferrin, phosphoglycerate kinase, sorbitol dehydrogenase, epididymal secretory glutathione peroxidase and epididymal secretory protein E1. Vasectomy also decreased melatonin concentrations in seasonal rams, and testosterone in all of them (p < 0.001), but did not affect antioxidant enzyme activity. Equatorial rams showed lower melatonin and testosterone concentration (p < 0.01) and catalase, but higher GPx activity (p < 0.05). In conclusion, vasectomy modifies the protein profile and hormonal content of ram seminal plasma, whereas the exposure to a constant photoperiod affects hormonal concentration and antioxidant enzymes activity.
In this study, we demonstrated that, in seasonal Mediterranean ovine breeds, supplementing the TALP medium with cAMP-elevating agents (the cocktail medium) is effective for achieving ram sperm capacitation, and that melatonin is able to regulate this phenomenon. We investigated the behavior under capacitating conditions using the TALP and cocktail mediums, and the response to melatonin, of spermatozoa from three sheep breeds (Colombian Creole, Romney Marsh, and Hampshire) subject to the equatorial photoperiod, during the dry and the rainy seasons. The cocktail medium was able to induce sperm capacitation, assayed by chlortetracycline staining and phosphotyrosine levels, to a greater extent than TALP, without a higher loss of viability (membrane integrity and viable spermatozoa without phosphatidylserine (PS) translocation). The addition of melatonin at 100 pM or 1 µM in the cocktail medium partially prevented the decrease in viability without PS translocation and the increase in capacitated spermatozoa from all breeds, with no significant effect on phosphotyrosine levels. Differences between breeds and seasons were evidenced. This study shows that melatonin is able to exert direct effects on spermatozoa in ovine breeds under equatorial photoperiod conditions, as it does in seasonal breeds located in temperate regions.
27 April 2022 in Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú
El objetivo del estudio fue determinar mediante SDS PAGE el perfil de proteínas del plasma seminal de toros criollos Romosinuano (ROMO) y Costeño con Cuernos (CCC) y su relación con los parámetros de calidad espermática en semen fresco y descongelado. Se colectaron tres eyaculados por toro mediante electro-eyaculación de 10 reproductores ROMO y 10 CCC. En semen fresco se determinó viabilidad (VF), motilidad masal (MMF), motilidad individual rápida progresiva (MIRPF) y concentración espermática (CE). El plasma seminal (PS) se obtuvo mediante doble centrifugación. En el semen descongelado se determinó motilidad individual de rápidos progresivos (MIRPPC), progresividad (PRPC), rápidos progresivos (RPPC) y medios progresivos (MPPC), en ambos casos usando el sistema de análisis computarizado CASA. Adicionalmente se determinó la viabilidad (VPC), e integridad de la membrana mediante el test hipoosmótico. Las proteínas se separaron por electroforesis en geles de poliacrilamida (SDS PAGE). Los datos se analizaron mediante prueba de T de student y la presencia de proteínas por Chi cuadrado. La relación entre las proteínas y los parámetros de calidad seminal mediante la prueba de correlación de Pearson y componentes principales de regresión hacia adelante. En semen fresco se evidenciaron diferencias (p<0.05) entre las dos razas para CE y MIRPF, y en semen congelado-descongelado para VPC. Se evidenciaron 10 bandas de proteína en toros ROMO y 7 en toros CCC. Las bandas de 13, 83 y 121 kDa se relacionaron positivamente y la de 15 kDa negativamente con VF de toros ROMO. Las bandas de proteínas de 21, 25, 102 y 174 se relacionaron tanto con MF y CE en toros ROMO. En conclusión, se establecieron los perfiles electroforéticos de proteínas del plasma seminal de toros ROMO y CCC. Las relaciones entre las bandas detectadas con la calidad espermática podrían explicar en parte la capacidad fecundante del espermatozoide de estas razas.
Introducción. Los sistemas silvopastoriles son esquemas de producción ganadera con potencial para mitigar el efecto negativo del ambiente en la productividad animal. Objetivo. El objetivo del presente trabajo fue evaluar los efectos de sistemas silvopastoriles de estratos múltiples sobre el estrés calórico y la población de dípteros hematófagos en ganado de carne. Materiales y métodos. Se analizó entre mayo y octubre del 2014, en el centro de investigación Turipaná, Córdoba, Colombia, el comportamiento de animales Cebú Brahman y Romosinuano, en dos arreglos silvopastoriles (aSSP) con diversidad en su composición y estratificación vegetal (p-Arbust con dos estratos y p-Arbust-Arbor con tres estratos) y en una pradera sin árboles, con un diseño de bloques completos al azar. En cada tratamiento se evaluaron la temperatura ambiental (TA) y la humedad relativa (HR), y se construyó un índice de temperatura-humedad (ITH). En los animales se evaluó la temperatura de piel (TP) y la frecuencia respiratoria (FR) a dos horas del día (6:00 y 13:00), y se contaron los dípteros hematófagos (CDH) entre las 8:00 y 10:00 h. Los datos se sometieron a un análisis de varianza para modelos mixtos en las variables TA, HR, TP e ITH y modelos mixtos generalizados para CDH y FR. Resultados. Las variables ambientales estuvieron influenciadas por múltiples factores, entre ellos, el cambio en los horarios de muestreo y el arreglo silvopastoril. La mayor carga ambiental (ITH) se observó durante la tarde, evaluación que influyó significativamente sobre la respuesta en FR con aumentos que alcanzaron 2,1 veces más en el tratamiento Pasto, contra 0,8 en p-Arbust-Arbor. Conclusiones. Los aSSP evaluados presentaron ventajas comparativas frente a la reducción del estrés calórico y el conteo de moscas hematófagas bajo condiciones del valle medio del río Sinú. El aSSP p-Arbust, logró mantener los conteos de moscas más bajos a través del tiempo.
El objetivo de este estudio fue determinar la expresión de proteínas del fluido folicular (FF) y su relación con la calidad del oocito. Se evaluaron 52 ovarios de planta de faenado de vacas Cebú comercial, mediante la técnica de disección y aspiración folicular se obtuvo FF y oocitos. Las evaluaciones realizadas fueron: calidad del oocito por aspecto citoplasmático y células del cúmulos y perfil de proteínas del FF mediante SDS-PAGE. Se realizó el análisis descriptivo, a través del procedimiento MEANS, análisis de varianza (PROC. ANOVA) y para las diferencias estadísticas significativas se usó la prueba de comparación de Bonferroni con un nivel de significancia del 5%, mediante el paquete estadístico SAS®. El 52% de los oocitos se categorizaron con calidad I-II. El análisis unidimensional de las proteínas del FF evidenció la presencia de 25 bandas de proteína entre 9 y 240 kDa. En folículos 6mm 20 bandas. Las bandas de peso molecular (PM) de 26kDa, 57kDa y 68kDa representan la mayor concentración en el FF; 4 bandas de PM 14 KDa, 34 KDa, 76 y 79 KDa, solo en folículos de 3 mm. La banda de 32 KDa no se observó en folículos > de 6mm. Las bandas de mayor frecuencia de presentación fueron las de 26, 40, 42, 57, 68, 240 KDa. Las bandas de proteína que se asociaron con la calidad del oocito en forma significativa (p<0,05) fueron las de PM 24, 57, 68 y 164 KDa para FF de folículos de 6mm. Los resultados nos indican asociaciones de la calidad del oocito con algunas bandas de proteína.
Introduction. Studies on the structural characteristics of the ovary associated with the quality of the cumulus-oocyte complex (COCs) in cattle contribute to the definition of strategies to improve reproductive efficiency. Objective. To determine the weight and size of the ovaries, follicle quality, and COCs in Zebu females, in order to establish differences between the right and left ovary. Materials and methods. Between March and July 2017, 52 ovaries were obtained from twenty-six Zebu cows. The ovaries and follicles were weighed and measured. The follicles were grouped into three categories: a) 6 mm (TFIII). The follicles quality was determined by the irrigation-translucency technique (TIT) and the COCs by the characteristics of the cytoplasm and cumulus cells as good (CI), fair (CII), and poor (CIII), and by cresyl brilliant blue test were categorized as BCB+ and BCB-. Results. Ovarian length, width and weight were 2.7 ± 0.6 cm, 1.8 ± 0.5 cm, and 7.0 ± 3 g, respectively, with differences for length and weight between the right and left ovary (p<0.01). The highest number of follicles were obtained in TFI (p<0.05). The 88.56 % of the follicles evaluated were of good quality. A total of 52 % and 44.2 % of COCs were classified as CI and BCB+, respectively. When follicle size and COC quality were considered, it was shown that in the TFI group 22 % were IC, 34 % CII, and 44 % CIII, and in the TFII group 31 % were IC, 21 % CII and 48 % CIII. No differences were observed between left and right ovary. Conclusion. The right ovary presented a greater size and weight, a greater number of follicular structures and a greater number of good quality CCOs.