Serine proteinases in Leishmania (Viannia) braziliensis promastigotes were assessed in this work. This study included the investigation of the enzymatic activity of subcellular fractions obtained from benzamidine affinity chromatography, reverse transcription polymerase chain reactions, and in silico assays of subcellular localization of subtilisin. Promastigote serine proteinases showed gelatinolytic activity with molecular masses of 43 kDa to 170 kDa in the cytosolic fraction and 67 kDa to 170 kDa in the membranous fraction. Serine proteinase activities were detected using N-benzyloxycarbonyl-l-phenylalanyl-l-arginine 7-amino-4-methylcoumarin (Z-FR-AMC) and N-succinyl-l-alanine-l-phenylalanine-l-lysine 7-amino-4-methylcoumarin (Suc-AFK-AMC) as substrates in the cytosolic fraction (Z-FR-AMC = 392 ± 30 µmol.min⁻¹ mg of protein⁻¹ and Suc-AFK-AMC = 252 ± 20 µmol.min⁻¹ mg of protein⁻¹) and in the membranous fraction (Z-FR-AMC = 53 ± 5 µmol.min⁻¹ mg of protein⁻¹ and Suc-AFK-AMC = 63.6 ± 6.5 µmol.min⁻¹ mg of protein⁻¹). Enzyme specificity was shown by inhibition with aprotinin (19% to 80% inhibition) and phenylmethanesulfonyl fluoride (3% to 69%), depending on the subcellular fraction and substrate. The expression of subtilisin (LbrM.13.0860 and LbrM.28.2570) and tryparedoxin peroxidase (LbrM.15.1080) genes was observed by the detection of RNA transcripts 200 bp, 162 bp, and 166 bp long, respectively. Subsequent in silico assays showed LbrM.13.0860 can be located in the cytosol and LbrM.28.2570 in the membrane of the parasite. Data obtained here show the subcellular distribution and expression of serine proteinases, including the subtilisin-like serine proteinases in L. (V.) braziliensis promastigotes.

Cysteine proteinases are well-known virulence factors of Leishmania spp. with demonstrated actions in both experimental mouse infection and human infection. However, studies on these enzymes in canine leishmaniasis are scarce. Here, we show, for the first time, the reactivity of sera from dogs living in an endemic area to a recombinant protein from the COOH-terminal region of cysteine B protease. In this work, enzyme-linked immunosorbent assays were performed using a 14kDa rcyspep protein obtained through a pET28-a expression system in Escherichia coli. First, 96-well plates were coated with rcyspep (500ng/well) and incubated with sera from dogs (1:100). Subsequently, IgG antibody detection was performed using rabbit anti-dog IgG antibodies conjugated with peroxidase. Sera from dogs (n=114), including suspect (n=30) and positive (n=50) dogs from a leishmaniasis-endemic area and dogs from a nonendemic area, (n=34), negative for leishmaniasis, were assessed. The results showed that sera from the suspect (42%) and positive (68%) groups responded differently to the antigen titers tested above the cut-off (Optical Density=0.166). This finding suggests that the immune response detected against cyspep may be related to clinical disorders present in these animals. Collectively, the data gathered here suggest that cyspep can sensitize the immune systems of dogs from a leishmaniasis-endemic area to elicit a humoral response, an immunological parameter indicating the contribution of this protein in host-parasite interaction.

O objetivo desse artigo é apresentar estudo de avaliabilidade da Guia de medidas de saúde pública não farmacológicas elaborado em 2020 pela OPAS a fim de maximizar sua utilidade na comunicação de risco em situações de surto e epidemias. Foi adotada abordagem descritivo-qualitativa norteada pelas etapas: (a) Pesquisa documental; (b) Modelização da intervenção; (c) Extração de evidências sobre as ações propostas no documento; (d) Validação do modelo teórico lógico; (e) Elaboração de perguntas avaliativas. Análise documental apontou uma multiplicidade de ações para reduzir a transmissão comunitária, priorizando o envolvimento da sociedade, além de parceria com instituições governamentais e não governamentais. O modelo teórico lógico validado permitiu identificar elementos que poderão ser úteis como lições no sentido de fortalecer as capacidades de preparação, prontidão e resposta, no âmbito dos Sistemas de saúde, em relação aos desastres e demais emergências em saúde pública.

A Doença de Chagas (DC) é uma enfermidade parasitária crônica causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, com maior prevalência em populações em situação de vulnerabilidade socioeconômica. É endêmica em 21 países das Américas e classificada como doença tropical negligenciada. A DC afeta a qualidade de vida, a produtividade e gera impactos econômicos significativos, sendo a detecção precoce crucial para melhorar esses indicadores. Para uma gestão eficaz dos recursos é necessário dispor de informações econômicas adequadas sobre custos e desfechos em saúde. Esta revisão analisou estudos de avaliação econômica sobre rastreamento precoce da DC em populações de risco, abordando os tipos de avaliação, modelos analíticos e métodos de custeio. Foram seguidas as recomendações PRISMA e pesquisados as bases bibliográficas MEDLINE, EMBASE e o Portal Regional da Biblioteca Virtual em Saúde. Três estudos que avaliaram indivíduos latino-americanos residentes na Europa foram selecionados. Foi avaliado o custo-utilidade por meio dos anos de vida ajustados por qualidade (QALY), sendo apresentados custos diretos (médicos e não médicos) e indiretos em Euros. A razão de custo-utilidade incremental (ICUR) foi a medida de custo-efetividade utilizada. Os resultados mostraram que o rastreamento da DC foi a estratégia mais custo-efetiva em todas as abordagens analisadas, com o custo por QALY ganho abaixo do limiar de 30.000 euros, valor aceito na Espanha e em outros países europeus. Assim, as avaliações econômicas são essenciais para a tomada de decisões sobre prevenção e controle da doença.