Este trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade microbiológica de carnes bovinas in natura resfriadas comercializadas em supermercados do Distrito Federal. Foram coletadas 16 amostras, sendo 8 amostras embaladas a vácuo (CA) e 8 amostras embaladas em bandeja de poliestireno envoltas em papel filme (CB). As análises microbiológicas incluíram a determinação de microrganismos mesófilos e psicrotróficos, coliformes totais e termotolerantes, Staphylococcus aureus e a pesquisa de Escherichia coli e Salmonella spp. Além disso, realizou-se o teste de suscetibilidade antimicrobiana das cepas de E. coli isoladas. Os resultados mostraram que 37,50% (6/16) das amostras ultrapassaram o limite permitido pela legislação brasileira de 2,00 log NMP/g para coliformes termotolerantes, sendo 2 amostras (12,50%) de CV e 4 amostras (25,00%) de CB. Nenhuma amostra apresentou contaminação por Salmonella spp. Em relação a bactéria S. aureus, 10 amostras (62,50%) estavam contaminadas, com contagens entre 2,00 e 2,88 log UFC/g, sendo que 4 amostras (25,00%) eram de CA e 6 amostras (37,50%) eram de CB. Foram confirmadas geneticamente 27 cepas de E. coli e observou-se o maior perfil de resistência antimicrobiana à sulfonamida (48,15%), além de perfis relevantes de resistência e sensibilidade intermediária para amoxicilina + ácido clavulânico (48,15%) e sensibilidade intermediária à ciprofloxacina (37,04%). Além disso, 22,22% (6/27) das cepas de E. coli apresentaram um perfil de multirresistência a antimicrobianos, caracterizado pela resistência a pelo menos três classes distintas de antibióticos. Assim, os resultados evidenciam preocupações quanto à qualidade microbiológica em carnes bovinas comercializadas no Distrito Federal, ressaltando a necessidade de melhores práticas sanitárias.